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细胞克隆形成实验

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产品描述

  细胞克隆形成实验是用来检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性等的重要技术方法。实验方法包括平板克隆形成实验软琼脂克隆形成实验。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强;初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强;二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强。由于克隆形成率与接种密度有一定关系,做克隆形成率测定时,接种细胞一定要分散成单细胞悬液,随时检查,到细胞形成克隆时终止培养。

 

  当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞,大小在0.3-1.0 mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。通过一定的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测,细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。

 

技术流程

 A、平板克隆形成实验:适用于贴壁生长的细胞

  1、取对数生长期的各组细胞,制备细胞悬液

  2、将细胞悬液作梯度倍数稀释,分别接种含培养液的皿中,培养2-3周

  3、经常观察,当培养皿中出现肉眼可见的克隆时,终止培养

  4、弃去上清液,4%多聚甲醛固定,GIMSA染色液染10-30 min

  5、计算克隆形成率,克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)× 100%

  6、结果统计分析

 

 B、软琼脂克隆形成实验:适用于非附着依赖性生长的细胞

  1、制备细胞悬液,梯度倍数稀释

  2、分别制备1.2%和0.7%琼脂糖溶液

  3、下层琼脂凝固后放入37℃培养箱备用

  4、加入细胞悬液,待上层琼脂凝固后,培养10-14天

  5、计算克隆形成率,克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)× 100%

  6、结果统计分析

 

服务说明

  1、客户提供:细胞株,所需药品,药物处理方式和浓度

  2、公司提供:原始数据及分析结果、完整的实验报告

  3、实验周期:20-40个工作日,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定

关键词:
吉卡生物
细胞克隆形成实验
医学检测
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