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MEDICAL SERVICES
稳定表达细胞系构建
将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上，载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中，用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin)，筛选得到可稳定表达目的蛋白，或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。
慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达，因此，慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。
稳转株主要应用于以下研究中：
1、需要长期在目的细胞中研究基因功能。通过构建稳定株，可以大大降低频繁转染或者病毒包装的成本，也方便长期的实验研究
2、部分蛋白半衰期及长，瞬时RNA只能干扰表达，无法去除已经表达的目的蛋白，通过构建稳定株可以实验更好的基因干扰效果
3、瞬转会引入不可预期的拷贝数表达(往往瞬时表达较高)，导致因为人为因素造成实验结果的不精确，构建稳定株可以帮助筛选到拷贝数适量的细胞进行实验研究
4、稳转株可以用于诱导表达系统的实验，用于控制基因的时空表达
5、需要用目的细胞构建动物模型的实验，往往需要构建成稳定株
注意事项（有多种因素容易导致稳转株构建失败）
1、支原体污染问题
2、慢病毒保存不当
3、慢病毒制备后反复冻融
4、目的基因表达水平低
5、细胞感染病毒后毒性大导致细胞死亡
技术流程
1、目的细胞的合适抗生素浓度筛选
2、目的细胞的合适病毒滴度筛选
3、慢病毒构建与包装与滴度测定
4、慢病毒感染
5、特定抗生素筛选稳转细胞株
6、稳转细胞株鉴定
服务说明
1、T25一瓶和冻存株一支
2、照片、实验步骤及检测结果
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