在线客服
客服热线
13353108343
客服组:
在线客服
QQ:
服务时间:
8:00 - 17:00

网站建设:中企动力 长春

吉ICP备19000764号

导航管理

3333号长春北湖科技园产业2-1期E9栋

吉林吉卡生物技术有限公司

地址:吉林省长春市北湖科技开发区盛北大街

传真:0431-8888888

返回首页           关于吉卡           新闻中心
产品展示           加入我们           联系我们

友情链接:

Links

电话:13353108343
 

版权所有:

  • 2
>
医学服务

医学服务

MEDICAL SERVICES

产品名称

稳定表达细胞系构建

规格型号
所属分类
数量
-
+
没有此类产品
产品描述
产品参数

  将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。

  慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达,因此,慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。

  稳转株主要应用于以下研究中:

  1、需要长期在目的细胞中研究基因功能。通过构建稳定株,可以大大降低频繁转染或者病毒包装的成本,也方便长期的实验研究;

  2、部分蛋白半衰期及长,瞬时RNA只能干扰表达,无法去除已经表达的目的蛋白,通过构建稳定株可以实验更好的基因干扰效果;

  3、瞬转会引入不可预期的拷贝数表达(往往瞬时表达较高),导致因为人为因素造成实验结果的不精确,构建稳定株可以帮助筛选到拷贝数适量的细胞进行实验研究;

  4、稳转株可以用于诱导表达系统的实验,用于控制基因的时空表达;

  5、需要用目的细胞构建动物模型的实验,往往需要构建成稳定株。

  注意事项

  有多种因素容易导致稳转株构建失败:

  1.支原体污染问题

  2.慢病毒保存不当

  3.慢病毒制备后反复冻融;

  4.目的基因表达水平低

  5.细胞感染病毒后毒性大导致细胞死亡。

  技术流程

  1.目的细胞的合适抗生素浓度筛选;

  2.目的细胞的合适病毒滴度筛选;

  3.慢病毒构建与包装与滴度测定;

  4.慢病毒感染;

  5.特定抗生素筛选稳转细胞株;

  6.稳转细胞株鉴定

  服务说明

  1.T25一瓶和冻存株一支。

  2.照片、实验步骤及检测结果。

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加
暂未实现,敬请期待
暂未实现,敬请期待
关键词
上一篇
下一篇

报告单查询

REPORT INQUIRY