医学服务
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活性氧（ROS）检测
活性氧检测(Reactive Oxygen Species Assay Kit)是一种基于荧光染料DCFH-DA(2,7-Dichlorodi -hydrofluorescein diacetate)的荧光强度变化，定量检测细胞内活性氧水平的最常用方法。
DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜。进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不会通透细胞膜，因此探针很容易被积聚在细胞内。细胞内的活性氧能够氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。绿色荧光强度与活性氧的水平成正比。在最大激发波长480 nm，最大发射波长525 nm处，使用荧光显微镜，流式细胞仪或激光共聚焦显微镜等检测荧光信号。Rosup为活性氧阳性诱导药物，根据其荧光信号强度，可分析活性氧的真正水平。
注意事项
1、抗体
事先咨询我公司，明确抗体种属以及是否有该抗体可使用，如无可由双方协商而定，客户自己购买提供或我公司代购
2、标本收集与保存
组织样品：新鲜组织放入液氮或-70℃保存，组织不少于100mg(约绿豆大小)
培养细胞：通过细胞计数取不少于2×106个细胞于EP管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱(-70℃，避免反复冻融)
血液细胞标本：以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存(-70℃可长期保存，避免反复冻融)
血清或细胞培养液标本：离心去掉杂质后取上清入EP管，保存(以上4℃可保存15-20天，-70℃可长期保存，避免反复冻融)
3 、样本运输：可选以下任何的一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输
细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶(密封保证不污染，培养液不漏出，细胞不要长得太满，50%左右，灌满培养液)
血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保证液体不漏出，视路途远近2-3天可到达)
技术流程
1、细胞培养
2、用适当的方法诱导细胞凋亡，同时设立阴性对照组和阳性对照组，收集细胞
3、用PBS洗涤细胞三次，收集不多于1×106的细胞
4、取100 μL 10×Incubation Buffer加900μL灭菌去离子水稀释成1×Incubation Buffer，混匀并预热至37℃
5、吸取500 μL 1×Incubation Buffer，加入1μL JC-1，涡旋混匀配成JC-1工作液
6、取500 μL JC-1工作液将细胞均匀悬浮，37℃，5% CO2的培养箱中孵育15~20min
7、室温离心(2000rpm,5min)收集细胞，用1×Incubation Buffer洗两次
8、吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新悬浮细胞
9、流式细胞仪检测，分析
服务说明
1、细胞株(冻存株或培养好的细胞)，相关药品或MMP检测试剂盒(可代购)
2、实验步骤、结果图、数据结果和分析报告
3、实验周期：1-2周，具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定
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