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原代细胞分离

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详细介绍

  原代细胞(Primary Cell)是指从机体的组织或器官经胰蛋白酶、胶原酶、中性蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体环境培养的细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。

  原代细胞不仅广泛应用于分子生物学、细胞生物学和生物医学基础研究,还可应用于当今热门的生物医药产业,如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等;原代细胞在生物医药领域有不可替代性作用。

  注意事项

  1.要注意无菌操作。其操作要求应高于外科手术;

  2.整个取材操作要迅速,不能过长,以确保细胞活性。

  3.运用消化法时胰酶温度应低于37℃,浓度只需平时消化细胞浓度的一半,胰酶不能作用过强,否则细胞易被损伤而不易生存。

  4.如使用组织块法,则应待组织块略干燥,能黏附于瓶壁时再使之与培养液接触,匆使组织块漂浮起来。如果组织块没有黏壁,则细胞不易生长,即使生长也因没有贴在瓶壁上,从而因不能观察到而无法收集到生长的细胞。

  5.原代培养操作时,也可以使用未添加血清的DMEM或PBS洗涤组织块。

  技术流程

  1.试剂耗材准备

  2.取组织

  3.制备

  4.加培养液,37℃、5% CO2培养

  5.传代

  6.冻存

  7.复苏

  服务说明

  提供冻存或处于对数生长期的细胞株一瓶(细胞培养条件,图片)。

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